期刊简介
《中华心律失常学杂志》创刊于1997年。我们的办刊宗旨为贯彻党和国家的卫生方针和政策，为人民健康服务，理论与实践相结合，普及与提高相结合和百花齐放、百家争鸣的方针，反映我国的临床电生理工作的重大进展，促进国内外学术交流。以从事心律失常学和心血管病专业的医生和研究人员为主要读者对象，报道心律失常学与心血管病领域中领先的科研成果和临床诊疗经验，反映我国心律失常学临床与基础理论研究的重大进展，促进学术交流，并为相关专业人员进行继续教育的国家级杂志。
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- 杂志名称：中华心律失常学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1007-6638
- 国内刊号：11-3859/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏
犬骨髓间叶干细胞的分离培养和生物学特性
张澍；黄从新；任晓庆；浦介麟；王方正
关键词：间叶干细胞, 骨髓, 细胞培养, 心肌细胞, 脂肪细胞, 成骨细胞, 犬
摘要：目的建立犬骨髓间叶干细胞的体外分离、培养、扩增与鉴定方法,了解其生物学特性,为心肌梗死、心力衰竭及缓慢性心律失常的干细胞移植提供细胞材料.方法抽取犬骨髓液10 ml,以DMEM 1∶1稀释,用1.063 g/ml percoll密度分离液,以600 g离心力、30 min分离骨髓单个核细胞;以LG-DMEM及10% FBS添加100 U/ml青霉素,100 μg/ml链霉素,25 μg/ml两性霉素B培养骨髓干细胞;利用细胞贴壁筛选法分离、培养、扩增骨髓间叶干细胞;应用干细胞表面标志蛋白检测,诱导剂诱导分化间叶组织细胞等方法进行犬骨髓间叶干细胞的鉴定.结果分离出的犬骨髓单个核细胞约占细胞总数的10-4～10-6,在LG-DMEM与选择性血清培养基上生长良好.犬骨髓间叶干细胞孵育24 h即可见细胞贴壁生长,贴壁细胞约占接种单个核细胞总数的10-6.犬骨髓间叶干细胞增殖分裂迅速, 38～48 h内增殖多个细胞,约72 h即可增殖形成大的细胞克隆,7～10 d即可布满瓶底.细胞融合时类似成纤维细胞,呈纺锤状,细胞小而密集,螺旋梳状排列.连续培育10代以上,未见细胞形态、增殖特性发生改变.未见骨髓间叶干细胞自发分化其它类型细胞,仍维持原代培养细胞的增殖特性.犬骨髓间叶干细胞的表面标志SH2阳性,CD45则阴性.在化学诱导液的作用下,犬骨髓间叶干细胞能定向分化为心肌细胞、脂肪细胞、成骨细胞等多种间叶组织类型细胞.结论密度梯度分离法与贴壁筛选法能较好地进行犬骨髓间叶干细胞的体外分离、培养与扩增,犬骨髓间叶干细胞具备易于分离培养,巨大增殖潜力,独特细胞表型,多系分组能力等细胞生物学特性.为心肌梗死、心力衰竭与心律失常的细胞移植修复治疗提供了理想细胞材料.
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