期刊简介
《中华心律失常学杂志》创刊于1997年。我们的办刊宗旨为贯彻党和国家的卫生方针和政策，为人民健康服务，理论与实践相结合，普及与提高相结合和百花齐放、百家争鸣的方针，反映我国的临床电生理工作的重大进展，促进国内外学术交流。以从事心律失常学和心血管病专业的医生和研究人员为主要读者对象，报道心律失常学与心血管病领域中领先的科研成果和临床诊疗经验，反映我国心律失常学临床与基础理论研究的重大进展，促进学术交流，并为相关专业人员进行继续教育的国家级杂志。
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首页>中华心律失常学杂志
- 杂志名称：中华心律失常学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1007-6638
- 国内刊号：11-3859/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏
比较不同方法介导Gαi2羧基末端肽基因拮抗心肌细胞迷走神经效应的研究
孙庆权；芦颜美；王红丽；周祁娜；周贤惠；汤宝鹏
关键词：Gαi2羧基末端肽, 迷走神经, 卡巴胆碱, 乳鼠心肌细胞
摘要：目的 通过质粒电穿孔法、腺病毒转染法(rAd)和9型腺相关病毒转染法(rAVV9)转染Gαi2羧基末端肽(Gαi2lp)基因至乳鼠心肌细胞,比较不同方法的转染效率、心肌毒性以及对胆碱类药物迷走神经效应的拮抗作用,探寻Gi3ctp基因功能表达的佳转导途径.方法 构建重组质粒pDC316-Gαi2ctp-mCMV-EGFP(质粒电穿孔组)、重组腺病毒rAd-Gαi2ctp-mCMV-EGFP(rAd组)和重组9型腺相关病毒rAAV9-Gαi2ctp-IRES-EGFP(rAAV9组)以及未携带Gαi2ctp基因的空白对照组(n=10).3种方法转染携带免疫荧光蛋白(EGFP)的Gαi2tp目的基因至乳鼠心肌细胞,探寻佳电转导参数和病毒佳感染复数(MOI);比较佳参数下不同方法转染情况和大效率;AlamarBlue法测定各时间点还原比率评估心肌毒性;Western-blot法检测Cαi2ctp蛋白表达情况.后以适浓度的卡巴胆碱干预各组细胞,通过计数细胞整体搏动频率比较3种方法下Cαi2ctp基因的抗迷走神经效应差异.结果 3种方法佳参数设置下Gαi2ctp-EGFP蛋白均成功表达且差异无统计学意义,转染效率分别于2、1.5、4 d达高(54.2％±4.8％、100％和59.2％±4.4％),于第11 d转染效率分别为(30.1％±6.6％、12.0％±-3.4％和36.0％±6.1％);rAAV9组在全观察期l1d内细胞活性接近空白对照组(P＞0.05),质粒电穿孔组和rAd组细胞活性于3d后开始明显下降且后者较显著(P＜0.05).卡巴胆碱以佳药效浓度200 μg/ml干预培养3d后心肌细胞,发现Gαi2ctp基因组较无基因组具有明显的抗卡巴胆碱迷走神经效应(P＜0.05),但各方法之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 质粒电穿孔法转染方式迅速、转染效率尚可,但对细胞破坏力大;rAd法转染效率高可达100％,但表达持续时间较短,心肌毒性较大;rAAV9法转染起效较慢但能够稳定地长时间表达且生物安全性好.3种方法皆可有效表达Gαi2ctp并发挥拮抗卡巴胆碱迷走神经变时效应.该实验为Gαi2ctp转染治疗心房颤动提供了理论支持和方法学依据.
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